Slik beregner du Rf-verdier for TLC

Rf-verdien er retensjonsfaktoren som brukes ved identifisering av organiske forbindelser i en blanding. Rf-verdien beregnes ved å måle den relative avstanden som er reist av en bestemt organisk forbindelse i forhold til mobilfasen. Det beregnes i både papirkromatografi og TLC.

Tynnsjiktskromatografi (TLC) er en separasjonsmetode involvert i separering av to eller flere organiske forbindelser ved deres fordeling mellom faste og flytende faser. Den stasjonære (faste) fasen er en polar substans i TLC mens den mobile (flytende) fase er en enkelt eller en kombinasjon av løsningsmidler. Absorbenten er belagt som et tynt lag i en glideskinne. De organiske forbindelsene separeres ved å manipulere mobilfasen.

Nøkkelområder dekket

1. Hva er TLC
      - Definisjon, prinsipp, bruk
2. Slik beregner du Rf-verdier for TLC
     - Beregning av Rf-verdi

Nøkkelbetingelser: Mobilfase, Mobilitet, Rf-verdi, Stasjonær fase, Separasjon, Tynnsjiktkromatografi (TLC)

Hva er TLC

TLC er en kromatografiteknikk som er ansvarlig for separasjonen av organiske forbindelser på en blanding basert på deres relative mobilitet. Den bruker en solid stasjonær fase som består av en polar absorbent og en flytende mobil fase sammensatt av en enkelt eller en blanding av organiske løsningsmidler. Polarabsorbenten kan enten være finmalt alumina eller silikapartikler. Separasjon av svart blekk ved TLC er vist i Figur 1.

Figur 1: TLC av svart blekk

De organiske forbindelser og mobilfasen beveger seg over den stasjonære fasen på grunn av kapillærvirkningen. Differensialmobiliteten av organiske forbindelser oppnås ved den relative affiniteten av forbindelsene mot den stasjonære fase og mobilfasen. Forbindelsene med høyere affinitet i forhold til den stasjonære fasen beveger seg sakte ettersom den stasjonære fasen beholder de organiske forbindelser. Siden stasjonær fase er polar i TLC, beveger polære forbindelser seg sakte. Imidlertid beveger forbindelser med høyere affinitet mot mobilfasen raskere gjennom den stasjonære fasen. Mobilfasen er ikke-polar, og ikke-polare organiske forbindelser, som har mindre affinitet mot den stasjonære fasen, beveger seg raskere gjennom den stasjonære fasen. Individuelle forbindelser kan visualiseres som flekker etter separasjonen.

TLC brukes i:

  1. Bestemmelsen av antall forbindelser i en blanding
  2. Verifisering av sammensetningen av en blanding
  3. Bestemmelsen av riktige betingelser for kolonnekromatografi
  4. Analysere fraksjonene oppnådd ved kolonnekromatografi

Slik beregner du Rf-verdier for TLC

Rf-verdien er den relative avstanden som er reist av en bestemt forbindelse i forhold til mobilfasen. Det kan beregnes med følgende ligning.

Figur 2: Beregning av Rf-verdi

Rf = Avstand tilbakestilt av forbindelsen (a) / Avstand reist av løsningsmiddelfronten (b)

Rf-verdien kalles også forholdet til foran. Under definerte betingelser for stasjonær fase, mobil fase og temperaturen er Rf-verdien av en bestemt organisk forbindelse en konstant verdi. Imidlertid kan forskjellige organiske forbindelser med lignende polaritet ha lignende Rf-verdier. Derfor kan andre egenskaper av organiske forbindelser som farge på TLC-platen benyttes under identifikasjonen av forbindelsen.

Konklusjon

TLC er en kromatografiteknikk som brukes i separasjon av organiske forbindelser basert på deres polaritet. Differensialpolariteten til disse forbindelsene tillater differensialmobilitet gjennom den stasjonære fase av TLC. Rf-verdi er den relative mobiliteten til en bestemt organisk forbindelse i forhold til mobilfasen. Det beregnes ved å måle relative avstander som reist av de organiske forbindelsene.

Henvisning:

1. "Tynnsjiktkromatografi (TLC): prinsipp og prosedyre." Owlcation, 29. desember 2015, tilgjengelig her.

Bilde Courtesy: 

1. "TLC black ink" Av Den opprinnelige opplasteren var Natrij på English Wikipedia - Overført fra en.wikipedia til Commons (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Factor de retenció diagram" Av Cathan - Eget arbeid (Public Domain) via Commons Wikimedia