Forskjellen mellom HPLC og LCMS

Nøkkelforskjell - HPLC vs LCMS
 

La oss først se på betydningen av HPLC og LCMS før du analyserer forskjellen mellom HPLC og LCMS. Kromatografi er en separasjonsteknikk i kjemisk analyse hvor prøvebestanddelene separeres under passasje gjennom et kromatografisk medium. Det innebærer også samhandling med prøven, stasjonær fase og mobilfase. HPLC står for High Performance Liquid Chromatography, og det brukes som væskekromatografimetode i analytisk kjemi. Kombinasjonen av Væskekromatografi og massespektroskopi (LCMS) har blitt utviklet for kvantitativ analyse av utvalgte biomolekyler og det er en svært sensitiv, nøyaktig og spesifikk analyseprosedyre sammenlignet med HPLC. Dette er nøkkelforskjell mellom HPLC og LCMC. Denne artikkelen vil introdusere deg til HPLC og LCMC som omhandler kjemisk analyse og diskutere forskjellene mellom HPLC og LCMS.

Hva er HPLC?

Høyytende væskekromatografi (HPLC) er en populær separasjonsteknikk i analytisk kjemi. Det er hovedsakelig brukes til å skille komponentene, for å identifisere og kvantifisere hver komponent i en blanding. Tidligere var denne metoden kjent som høytrykks væskekromatografi fordi det var avhengig av pumper for å strømme et trykk væskesoppløsningsmiddel omfattende prøveblandingen gjennom en søyle pakket med et fast adsorpsjonsmateriale. Hver bestanddel i prøveblandingen interagerer annerledes med det faste adsorbentmaterialet, hvilket resulterer i forskjellige strømningshastigheter for forskjellige bestanddeler. Dette kan føre til separasjon av bestanddelene ettersom de strømmer ut HPLC-kolonnen.

HPLC har blitt brukt til forskjellige applikasjoner som for eksempel analyse av vitamin D nivåer i blod, ulovlig narkotikabruk av idrettsutøvere ved å oppdage stoffrester i urinen, sortere ut bestanddelene i en kompleks biologisk prøve for forskningsformål og analyse og produksjon av legemidler.

Hva er LCMS?

Væskekromatografi-massespektrometri (LCMS) er en analytisk teknikk som kombinerer den fysiske separasjonsevnen til væskekromatografi med masseanalysevnen til massespektrometri (MS). Væskekromatografi er en separasjonsteknikk, og massespektrometri brukes til å analysere masse-til-ladningsforholdet for ladede partikler. Den fysiske separasjonen oppnås vanligvis ved HPLC og alternativt, LCMS også kjent som HPLC-MS. LCMS er en dominerende analytisk teknikk som har a veldig høy nøyaktighet, følsomhet og spesifisitet sammenlignet med HPLC. Dermed er det nyttig i mange applikasjoner som forskningsformål, stoffanalyse, matanalyse, etc. LCMS er hovedsakelig brukes til å separere, oppdage, identifisere og kvantifisere biokjemiske egenskaper av en bestemt prøve i nærvær av komplekse kjemiske blandinger.

Hva er forskjellen mellom HPLC og LCMC?

Akronym og definisjon av HPLC og LCMC

HPLC: HPLC står for høyytende væskekromatografi. Det er en separasjonsteknikk som hovedsakelig brukes til å skille komponentene, for å identifisere og kvantifisere hver komponent i en blanding.

LCMS: LCMS står forFlytende kromatografi og massespektrometri. Det er en analytisk teknikk som kombinerer den fysiske separasjonsevnen til væskekromatografi med massanalysegenskapene til massespektrometri (MS).

Kjennetegn på HPLC og LCMC

Klassifisering

HPLC: Dette er bare en væskekromatografimetode.

LCMS: Dette er en kombinasjon av væskekromatografimetode og massespektrometri metode.

Effektivitet

HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre effektiv og langsommere.

LCMS: Sammenliknet med HPLC er LCMS-analysen effektiv og raskere.

Følsomhet

HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre følsom.

LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mer sensitiv.

spesifisitet

HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre spesifikk.

LCMS: Sammenliknet med HPLC er LCMS-analysen mer spesifikk.

nøyaktighet

HPLC: HPLC gir mindre nøyaktige resultater enn LCMS for bestemmelse av enkelte kjemikalier.

LCMS: LCMS gir mer nøyaktige resultater enn HPLC for bestemmelse av enkelte kjemikalier.

Komponent

HPLC: HPLC kan betraktes som en komponent av LCMS.

LCMS: LCMS kan ikke betraktes som en komponent av HPLC.

Ion Source

HPLC: Ion-kilde finnes ikke i HPLC-instrument.

LCMS: Ion-kilde er tilstede i LCMS-instrument.

applikasjoner

HPLC: Ioner, polymerer, organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres ved hjelp av HPLC.

LCMS: Organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres. Kontrast til HPLC kan LCMS brukes til å undersøke ufullstendig oppløste blandinger.

Operasjon

HPLC: Diagrammet til et HPLC instrument er gitt i figur 1, og det inkluderer vanligvis en autosampler, pumper og en detektor. Prøvetakeren introduserer prøveblandingen i mobilfasen (trykkblanding av oppløsningsmidler som vann, acetonitril og / eller metanol) som overfører det til kolonnen. Pumpene leverer ønsket flyt og sammensetning av mobilfasen gjennom kolonnen. Kolonnen er fylt med adsorbenten, som er en kornig fast partikkel slik som silika eller polymerer. Detektoren frembringer et signal som er proporsjonalt med mengden av bestanddel i prøven som er tilstede i kolonnen, og tillater derfor kvantifiserbar analyse av de utvalgte prøvebestanddeler. HPLC-instrumentet styres, og dataanalyse leveres av en digital mikroprosessor og brukerprogramvare.

Figur 1: Diagram over HPLC instrument

LCMS: Diagrammet av LCMS instrument er gitt i figur 2. Prøveekstraktet settes inn i kolonnen som består av HPLC. Denne kolonnen beholder prøve metabolitter basert på fysiske tegn, og forskjellige metabolitter strømmer til massespektrometeret ved forskjellige tidsintervaller. Massespektroskopi brukes til å bestemme partikkelmasse, for å bestemme elementarrangementet av et molekyl og for å klargjøre molekylstrukturer. Imidlertid bør prøven ioniseres for å generere ladede molekyler for å bestemme deres masse-til-ladningsforhold. Derfor, i stedet for HPLC-instrumenter, består LCMS av ytterligere tre moduler, for eksempel jernkilde, masseanalysator og en detektor. En ionkilde kan omdanne gassfase-prøven til ioner og en masseanalysator som grupperer ioner av deres masser ved hjelp av elektromagnetiske felt. Endelig kvantifiserer en detektor verdiene og leverer data for hver ion tilstede i prøven. LCMS teknikken kan brukes til både kvalitative og kvantitative applikasjoner.

  Figur 2: Diagram over LCMS instrument

Som konklusjon er HPLC en væskekromatografimetode mens LCMS er en kombinasjon av væskekromatografi og massespektrometri. Begge disse analyseteknikkene har forskjellige egenskaper, men de kan brukes til å identifisere og kvantifisere matblandinger, legemidler og andre bioaktive molekyler.

Referanser Arpino, P. (1992). Kombinert væskekromatografi massespektrometri. Del III. Anvendelser av termospray. Massespektrometri Anmeldelser, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. og Spoendlin, C. (2004). Praktiske aspekter ved hurtig reversert fase høyytelsesvæskekromatografi ved bruk av 3 μm partikkelpakket kolonner og monolitiske kolonner i farmasøytisk utvikling og produksjon som arbeider under dagens god produksjonspraksis. Journal of Chromatography, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. og Kerns, E.H. (1999). LC / MS applikasjoner i stoffutvikling. Massespektrometri Anmeldelser, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Kobling av matrisassistert laser desorption / ionisering til væskeseparasjoner. Massespektrometri Anmeldelser 16 (5): 283. Image Courtesy: "Hplc" av Original opplasteren var Kjaergaard på en.wikipedia - Overført fra en.wikipedia. (Offentlig domene) via Commons