Forskjellen mellom HPLC og HPTLC
Share
Nøkkelforskjell - HPLC vs HPTLC
Hovedforskjellen mellom HPLC og HPTLC er det HPLC tillater kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve, mens HPTLC ikke tillater kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve.
Kromatografi er en fysisk separasjonsmetode som brukes til å skille og identifisere komponentene i en blanding. Både HPLC og HPTLC er kromatografiske teknikker. HPLC er høyytelsesvæskekromatografi. HPTLC er høyytelses tynnsjiktskromatografi.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er HPLC
3. Hva er HPTLC
4. Sammenligning ved siden av siden - HPLC vs HPTLC i tabellform
5. Sammendrag
Hva er HPLC?
HPLC er høyytelsesvæskekromatografi. Det er en analytisk teknikk som brukes til å skille, identifisere og kvantifisere komponenter i en blanding. I denne teknikken oppløses prøven i et egnet løsningsmiddel. Deretter ledes løsningsmidlet med prøven gjennom en pumpe med et gitt trykk. Pumpen er fylt med fast adsorpsjonsmateriale. Deretter binder noen komponenter sterkt til det absorberende materialet mens andre komponenter binder løst. Dette fører til at komponentene har forskjellige strømningshastigheter gjennom pumpen. Derfor kan komponentene enkelt separeres.
Figur 01: Et HPLC-system
Det adsorbentmaterialet som fyller pumpen, er kjent som stasjoner fase. Oppløsningsmidlet med den oppløste prøve er kjent som mobilfasen. Pumpen som brukes i denne teknikken kalles kolonnen. Kolonnen er fylt med et adsorbentmateriale, oftest silikapartikler. Størrelsen på disse partiklene kan variere fra 2-50 um. Separasjonsprosessen påvirkes av sammensetningen av mobilfasen og temperaturen i systemet. Samspillet mellom den stasjonære fasen og komponenten i prøven kan være hydrofobe interaksjoner, dipol-dipol-interaksjoner, ionisk binding osv..
Operasjonstrykket til HPLC er betydelig høyere enn for den tradisjonelle væskekromatografi. Den ligger rundt 50-350 bar. Forskjellen mellom væskekromatografi og HPLC er at i væskekromatografi faller prøven gjennom kolonnen under tyngdekraften, mens prøven under HPLC trykkes gjennom kolonnen. Størrelsen på kolonnen og de absorberende partiklene er også svært liten sammenlignet med den tradisjonelle flytende kromatografi. Imidlertid er oppløsningen gitt av HPLC teknikken overlegen.
Hva er HPTLC?
HPTLC er høy ytelse tynnsjiktkromatografi. Det er den avanserte og automatiserte form for tradisjonell TLC. Denne teknikken gir en effektiv oppløsning på kort tid. I denne analysemetoden kan prøven og en referanse analyseres samtidig, noe som gjør at prøven kan sammenlignes med referansen. Det gir en forbedret analytisk nøyaktighet enn andre kromatografiske teknikker. Tidspunktet for analysen er mindre. Teknikken er en billig teknikk.
Figur 02: En analyse av matfargestoffer ved bruk av HPTLC
HPTLC-metoden er en enkel prosess, og prøveforberedelsestrinnet elimineres også. (I tradisjonell TLC er prøveforberedelsestrinnet inkludert før separasjonen. Dette trinnet omfatter rengjøring og anrikning). Løsningsmidlet kan brukes direkte uten forbehandling, selv om andre kromatografiske teknikker krever forbehandlinger som avgassing, filtrering osv..
Det adsorbentmateriale som brukes i HPTLC er silika med meget små partikkelstørrelser. I tradisjonell TLC er partikkelstørrelsen på silika 5-20 μm mens i HPTLC er den 4-8 μm. Prøven påføres på HPTLC-platen ved hjelp av en applikator. Det gir en jevn og sikker søknad. Deretter plasseres platene i et kammer som har mobilfasen. Kammeret skal være mettet med dampen i mobilfasen. Etter HPTLC-prosessen, kan flekkene som er flyttet detekteres. Ved oppdagelse av flekkene på platen bruker HPTLC-teknikken en egnet UV-region eller et jodkammer.
Hva er forskjellen mellom HPLC og HPTLC?
HPLC vs HPTLC | |
| HPLC er høyytelsesvæskekromatografi. | HPTLC er høyytelses tynnsjiktskromatografi. |
| Teknikk | |
| I HPLC føres den mobile fasen med løsningsmidlet gjennom en kolonne fylt med den stasjonære fasen. | I HPTLC blir prøven spottet på en TLC plate og er plassert inne i et kammer som inneholder mobilfasen; så får prøven migrere oppover platen sammen med mobilfasen. |
| Mål | |
| I HPLC brukes forskjellene mellom strømningshastigheter av komponenter gjennom kolonnen for å separere komponentene i prøven. | I HPTLC brukes forskjellene mellom avstandene som tilbys av hver komponent i prøven, for å skille komponentene i prøven. |
| Kvantitativ separasjon | |
| HPLC tillater kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve. | HPTLC tillater ikke kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve. |
Sammendrag - HPLC vs HPTLC
HPLC og HPTLC er to kromatografiske teknikker. Hovedforskjellen mellom HPLC og HPTLC er at HPLC tillater kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve, mens HPTLC ikke tillater kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve.
Henvisning:
1. "High Performance Liquid Chromatography." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10. april 2018, Tilgjengelig her.
2. "HPTLC." LinkedIn SlideShare, 30. mai 2011, Tilgjengelig her.
Bilde Courtesy:
1. "HPTLCplatetoMS" Av Kjaergaard på Engelsk Wikipedia - Overført fra en.wikipedia til Commons (Public Domain) via Commons Wikimedia
2. "Hplc" Av PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud MorlockAssociate Professor (Privatdozentin) Universitetet i HohenheimInstitute for Food Chemistry - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) via Commons Wikimedia
