Forskningsområdet har tatt en stor vri med introduksjon av cellekultivering og bruk av cellelinjer for forskning. Ulike tester utføres på kunstig preparerte celler og cellelinjer for å vurdere cellens oppførsel. Mest menneskelig basert forskning krever cellekulturer og cellelinjer for å validere resultatene, spesielt når forskningsstudiene er basert på farmakologi og legemiddelforskning. Primærcellekultur er en kultur fremstilt ved direkte isolering av celler via mekaniske eller enzymatiske metoder. En cellelinje fremstilles ved kontinuerlig å passere en primærcellekultur for å oppnå en cellelinje som har oppnådd homologe tegn. De nøkkelforskjell mellom den primære cellekultur og cellelinjen er antall passeringstider hver av dem har. Den primære cellekulturen isoleres direkte, mens en cellelinje fremstilles ved å passere en primærcellekultur i flere ganger.
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er en primærcellekultur
3. Hva er en Cell Line
4. Likheter mellom primærcellekultur og cellelinje
5. Side ved side-sammenligning - Primærcellekultur mot cellelinje i tabellform
6. Sammendrag
Primærcellekultur er et cellekulturpreparat ved å isolere celler direkte fra kilden via mekaniske eller enzymatiske metoder. Cellene isoleres ved trypsinisering eller ikke-trypsiniseringsmetoder. De primære cellekulturer dyrkes i egnet vekstmedium som inneholder vekstfaktorer, hormoner, lipider og andre udefinerte komponenter. Enkelte medier må ledsages av serum. Mediene sikrer at betingelsene for vekst er optimalisert, og cellene overlever under optimale forhold. Celler kan isoleres fra forskjellige vevskilder som levervev, endotel og nervevev hos mennesker eller høyere dyr via trypsinisering.
Ved isolering av celler fra planter og mikroorganismer, brukes spesielle utvinningsfremgangsmåter som bruker både mekaniske og kjemiske metoder. Disse isolerte celler kan immobiliseres på en fast bærer eller kan passasjeres i flere generasjoner for å bli utviklet til en cellelinje.
Primære cellekulturer er hovedsakelig av to typer; Adherente cellekulturer og suspensjoncellekulturer. Vedhørende primære cellekulturer er forankringsavhengige, og de krever solid støtte for veksten. De adherente primære cellekulturer er hovedsakelig avledet fra vev eller organer. Suspensjonen primære celle kulturer er forankrings-uavhengige, og de vokser i flytende media. Suspensjonskulturer skal kontinuerlig omrøres i vekstfasen. Suspensjonen primære celle kulturer kan være strakt avledet fra blod.
Primære cellekulturer har en relativt mindre levetid, men informasjonen avledet fra primære cellekulturer under in vitro forhold gir grunnlag for mange studier. De er nyttige for å studere cellegenskapene, både morfologisk og kjemisk oppførsel.
Cellelinjer er mye brukt i forskning, og for tiden er cellelinjer som kreftcellelinjer, levercellelinjer og nyrelinjelinjer kommersielt tilgjengelige for forskningsformål. Cellelinjene fremstilles ved kontinuerlig passering av primærcellekultur. Passaging refererer til subkultureringsprosessen hvor cellekulturer utvikles til en cellelinje. Disse cellelinjene er kulturer i todimensjonale eller tredimensjonale matriser og opprettholdes som cellelinjer.
Cellelinjer klassifiseres som endelige og kontinuerlige cellelinjer. Finite cellelinjer blir utsatt for et bestemt antall passasjer (20 - 30 passasjer). Ved fullføring av det nødvendige antall passasjer går cellen inn i et stadium av senescens. Disse cellene er enkle å håndtere ettersom deres vekst er bestemt. De kontinuerlige cellelinjer er også referert til som immortaliserte cellelinjer. Disse cellelinjene har ikke et bestemt antall passasjer. De vokser på ubestemt tid og er dermed i stand til å skaffe seg mutasjoner. Derfor er kontinuerlige cellelinjer lett muterte og dermed endres de i deres morfologiske og genetiske egenskaper, i motsetning til i endelige cellelinjer.
Figur 01: Cell Line
Cellelinjer brukes som det er mer praktisk enn å bruke en primær cellekultur, da den kan brukes igjen og igjen i en viss periode. Men det er mer utsatt for mutasjoner og forurensninger ettersom deres spredning øker.
Primærcellekultur mot cellelinje | |
En primærcellekultur er en kultur fremstilt ved direkte isolering av celler ved mekaniske eller enzymatiske metoder. | En cellelinje fremstilles ved kontinuerlig å passere en primærcellekultur for å oppnå en cellelinje som har oppnådd homologe tegn. |
Antall passasjer | |
Primære cellekulturer blir ikke passert, celler opprettholdes under dyrkningsbetingelser. | Celler passeres definitivt eller ubestemt i å lage cellelinjer. |
typer | |
Vedhørende primærcellekultur og suspensjon av primærcellekultur er to typer primære cellekulturer. | Finite cellelinje og kontinuerlig cellelinje er to typer cellelinjer. |
Levetid | |
Primære cellekulturer har kort levetid. | Cellelinjer har en lengre levetid. |
Primære cellekulturer og cellelinjer er mye brukt i forskning for å studere adferdsmønstre av forskjellige celler under forskjellige forhold og under forskjellige farmakologiske aspekter. Primære cellekulturer isoleres direkte fra kildeorganet eller vevet og dyrkes på et kulturmedium. Betingelsene er optimalisert for veksten av de spesifikke cellene. Cellelinjer, derimot, blir fremstilt ved å passere de primære cellekulturer for en endelig eller et uendelig antall ganger. Cellelinjer er kommersielt tilgjengelige og er populære blant forskere på grunn av brukervennligheten.
1.Lonza, Primærceller vs cellelinjer. Tilgjengelig her
1.Humancellelinjekolonien blir klonet in vitro ved bruk av kloningsringer 'Av Paphrag (CC BY-SA 2.5) via Commons Wikimedia