Forskjellen mellom monolayer og suspensjonskultur

Nøkkelforskjell - Monolayer vs suspensjonskultur
 

Vevkultur er en metode som brukes til å indusere veksten av celler som er skilt fra organismen og dyrkes i forskjellige kulturmedier. I vevskultur spiller kulturmediene en viktig rolle. Ulike celler vokser i forskjellige kulturmedier, avhengig av cellens fysiologiske og kjemiske egenskaper. Monolagskultur og suspensjonskultur er to hovedtyper av kulturer som brukes under prosessen med vevskultur. En monolagskultur er en forankring avhengig kultur hvor cellen vokser mens den er festet til et substrat og suspensjonskultur er en forankring uavhengig kultur hvor celleaggregater brukes til å etablere cellekulturer i flytende medier. Dette er nøkkelforskjell mellom monolagskultur og suspensjonskultur.

INNHOLD

1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er Monolayer Culture
3. Hva er suspensjonskultur
4. Likheter mellom Monolayer og Suspension Culture
5. Side ved side sammenligning - Monolayer vs Suspension Culture i Tabular Form
6. Sammendrag

Hva er Monolayer Culture?

Monolagskultur er definert som en type kultur hvor celler dyrkes i et enkeltlag på en kolbe eller petriskål som inneholder dyrkningsmediet. Monolagskultur er også referert til som adherent kultur eller forankringsavhengig kultur. Årsaken til å henvise til vedhengende eller forankringsavhengig kultur er at disse cellene trenger et underlag for vedlegg under deres vekst. De blir fulgt til cellekulturen som inneholder substratet.

Substrater som benyttes i kulturmediet bør belastes før bruk. Disse ladede substratene fremmer celle til celleinteraksjoner. Elektrisk ionladere, divalente kationbelegg og gamma-bestråling er kildene som brukes til å lade disse substratene. I monolagskulturmedium, når cellene er inokulert, reguleres veksten ved bruk av prosessen kalt kontaktinhibering. Under kontaktinhibering arrangeres celleveksten for å stoppe proliferering av normale celler når de danner et monolag festet til overflaten.

Figur 01: Vedvarende kultur

Cellene som er avhengige av andre substrater for vedlegg, refereres til som vedhengende celler. Disse adherent celler er ofte avledet fra organvev som nyre, etc. Disse cellene er immobile og er vanligvis festet til bindevevet. Derfor bør alle disse essensielle vekstfaktorene gis når de dyrker disse cellene på kulturmedier. Betydningen av monolagskultur er at den etterligner de opprinnelige naturlige forholdene for at cellen skal etablere seg riktig.

Hva er suspensjonskultur?

En suspensjonskultur kan defineres som en type kultur hvor multiplikasjon av små aggregater av celler eller enkeltceller foregår suspendert i et flytende medium som kontinuerlig omrøres. Med andre ord er suspensjonskultur også kjent som cellekultur av cellesuspensjonskultur. Denne kulturen hjelper til med etablering av enkeltcellekulturer som kan utnyttes i undersøkelsen av plantercellene med hensyn til deres forskjellige potensialer og egenskaper. Undersøkelse om dette aspektet kan brukes til å forstå sammenhenger mellom celler og deres innflytelse når det gjelder multicellulære organismer.

Under den første planteutviklingen dannes en callus som er en masse ufordelte celler. Dette vekstnivået forårsaker hindringer for identifisering av cellulære hendelser i vekst- og utviklingsfasen av planten. Suspensjonskultur ble introdusert for å overvinne denne situasjonen siden det ga et utmerket kulturmedium for etablering av enkeltcellekulturer fra småcellede aggregater oppnådd fra callus. Dette ble benyttet for å studere forskjellige morfologiske og biokjemiske aspekter i begynnelsen av en planteutvikling.

Figur 02: Suspensjonskultur

I sammenheng med å oppnå en ideell cellekultur, er den typiske metoden å overføre en sprø masse callus til et omrørt væskemedium hvor massen er ødelagt og dispergert lett. Etterpå blir de store calli screenet ut for å holde de små celleaggregatene og single celler. Deretter overføres disse cellene til et annet medium. Aktivt voksende celler oppnås etter to til tre uker.

Hva er likhetene mellom monolayer og suspensjonskultur?

• Både monolag og suspensjonskulturer er to typer cellekulturer som benyttes for etablering av celle
• Både monolag og suspensjonstyper av kulturer dyrkes på egnet dyrkningsmedium.
• Både monolag og suspensjonskulturer blir ofte brukt i vevskultur.

Hva er forskjellen mellom monolayer og suspensjonskultur?

Monolayer vs Suspension Culture
En monolagskultur er en forankringsavhengig kultur der cellene dyrkes mens de er festet til et substrat.	Suspensjonskultur er en forankringsuafhængig kultur hvor multiplikasjon av små aggregater av celler eller enkeltceller foregår suspendert i et flytende medium som blir omrørt.
Krav
Monolagskultur krever en vevskulturbehandlet beholder med periodisk passasje.	Suspensjonskultur kan oppnås ved behandling av ikke-vevskulturbehandlede kar.
Vekstbegrensninger
Veksten av monolagskultur vil bli begrenset av overflaten som direkte påvirker utbyttet.	Vekstbegrensning av suspensjonskulturen skjer ved konsentrasjon av celler i mediet.
Celldissosiering
Celledissociation foregår mekanisk eller enzymatisk i monolagskultur.	Suspensjonskultur krever ikke hjelp av enzymer og mekaniske midler for celledissociering.
Cellvisualisering
Monolayer-kultur tillater enkel visualisering av celler.	Det er vanskeligere å se celler i suspensjonskulturer.
Funksjon
Monolayer kultur brukes innen cytologi, forskning og kontinuerlig produkthøsting.	Suspensjonskultur brukes til bulkproduksjon av proteiner, forskningsstudier og batchhøsting.

Sammendrag - Monolayer vs suspensjonskultur

Monolagskultur og suspensjonskultur er to hovedkulturer anvendt i vevskultur. Monolagskulturen er en forankringsavhengig kultur. Cellene dyrkes i denne kulturen der de er festet til et substrat som er tilstede i kulturen. Substrømmene belastes før bruk med involvering av forskjellige kilder, for eksempel divalente belegg og ionladere. Suspensjonskulturer er forankringsuavhengige kulturer hvor cellene vokser uten hjelp av et substrat for vedlegg. Denne kulturen hjelper til med etablering av enkeltcellekulturer som kan utnyttes i undersøkelsen av plantercellene med hensyn til deres forskjellige potensialer og egenskaper. Dette er forskjellen mellom monolagskultur og suspensjonskultur.

Henvisning:

1. "Cell Suspension Culture: Definisjon, prinsipp, protokoll og betydning" Plantvæv. "Biologisk diskusjon, 26. oktober 2015. Tilgjengelig her 
2. "Adherent & Suspension Cell Cultures." Study.com, Study.com. Tilgjengelig her  

Bilde Courtesy:

1.Cell kultur på PNIPAM'By Guillaume Paumier (bruker: guillom) - Eget arbeid, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia 
2.'Fagnum palustre i Bioreactor'By ReskiLab, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia