Forskjellen mellom gramfarge og kultur
Share
Nøkkelforskjell - Gram Stain vs Culture
Gramfarging er en fargingsteknikk som utføres for å skille bakterier i to grupper i henhold til tykkelsen av peptidoglykanlaget i deres cellevegg. Kultur er en metode for å dyrke og opprettholde mikroorganismer under laboratorieforhold for ulike analyser. Nøkkelen forskjellen mellom gram flekk og kultur er deres funksjon; gram stamme en fargingsteknikk av bakterier hvor kultur er en metode for å dyrke og opprettholde mikroorganismer.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er Gram Stain
3. Hva er kultur
4. Sammenligning ved siden av siden - Gram Stain vs Culture
5. Sammendrag
Hva er Gram Stain?
Gramfarging er en viktig differensialfargingsteknikk som brukes til bakteriell identifikasjon i mikrobiologi. Denne teknikken ble introdusert av den danske bakteriologen Hans Christian Gram i 1884. Gramfarging kategoriserer bakterier i to hovedgrupper: gram positive og gram negative; disse er svært viktige i bakteriell klassifisering og identifikasjon. Gramfarging utføres som et innledende trinn for bakteriell karakterisering.
Bakterier grupperes basert på forskjellene i deres cellevegg. Gram-positive bakterier inneholder et tykt peptidoglykanlag i deres cellevegg mens Gram-negative bakterier inneholder et tynt peptidoglykanlag i deres cellevegg som vist i figur 01. Utfallet av gramfargingen vil være basert på tykkelsesforskjellen i peptidoglykanlaget av celleveggen.
Figur 1: Gram-positive bakterier og Gram-negative bakterier
Gramfarging utføres ved anvendelse av fire forskjellige reagenser nemlig; primær flekk, mordant, avfarvingsmiddel og motflekk. Krystallviolet og safranin tjener som primær- og motflettene, henholdsvis mens gram jod og 95% alkohol tjener som henholdsvis mordant og avfarvingsmiddel.
Grunnleggende trinn av Gram-flekk
- En bakteriell smøring er utarbeidet på en ren glassglass, varmesett og avkjølt.
- Smøre er oversvømt med krystallviolett i 1 - 2 minutter.
- Smøre skylles med tregt vann fra springen for å fjerne overflødige flekker.
- Gramjod påføres smøret i 1 minutt.
- Smøre skylles med tregt vann fra vannet
- Smøre vaskes med 95% alkohol i 2 - 5 sekunder og skylles med langsomt rennende vann fra springen.
- Smøre er fargelagt med safranin i 1 minutt
- Smøre skylles med langsomt kranevann, tørkes og observeres under mikroskopet.
På slutten av gramflekken vil gramnegative bakterier bli observert i rosa farge mens de gram positive bakteriene vil bli observert i lilla farge som vist i figur 02. Utfallet av gramflekken bestemmes av tykkelsen av peptidoglykanlaget i deres cellevegg. Under avfargingstrinnet blir primær flekk og mordanten lett fjernet fra gramnegative bakterier og blir fargeløse siden de har et tynt peptidoglykanlag. Den primære flekken holdes i gram-positive bakterier siden de har et tykt peptidoglykan-lag. Tellerflekk vil ikke være effektiv for gram positive bakterier på grunn av retensjon av den primære flekken. Så gram positive bakterier vil være synlige i primær flekkfarge, dvs. lilla farge. Counter stain vil flekke de gramnegative bakteriene og vil være synlig i valgfarge som er safraninfargen. Det er derfor lett å kategorisere bakterier i to grupper av gramflekken, og det er verdifullt i bakteriell differensiering og identifikasjon.
Figur 2: Gram Stamme
Hva er kultur?
Mikrobiel kultur er en metode for dyrking og opprettholdelse av mikroorganismer under laboratorieforhold for forskjellige formål. Kulturer dyrkes i fast, halvfast og flytende medium basert på typen og formålet med mikroorganismen dyrking. Kulturer er forsynt med nødvendige næringsstoffer og vekstforhold som kreves av mikroorganismer. Det finnes forskjellige komponenter i et kulturmedium som energikilde, karbonkilde, nitrogenkilde, mineraler, mikronæringsstoffer, vann, størkningsmiddel etc. Optimal temperatur, oksygen og pH bør justeres i henhold til typen av mikroorganismen som dyrkes.
Det finnes forskjellige typer mikrobielle kulturer; for eksempel batchkultur, kontinuerlig kultur, stablingskultur, agarplattekultur, buljongkultur, etc. Ifølge sammensetningen av vekstmediet er det forskjellige typer kulturmedier kjent som syntetiske medier, semisyntetiske medier og naturlige medier. Mikrobielle kulturer fremstilles under sterile forhold inne i et spesielt kammer kalt laminar luftstrøm. Voksende medium og glasset steriliseres før inokulering av den ønskede mikroorganismen. Under riktige sterile betingelser overføres målmikroorganismen til det steriliserte næringsmediet og inkuberes ved optimal temperatur. Inne i mediet vil mikroorganismen vokse og formere seg ved hjelp av de tilveiebragte næringsstoffene.
Figur 3: En bakteriekultur på plate
Hva er forskjellen mellom Gram Stain and Culture?
Gram Stain vs Culture | |
| Gram stamme er en differensial fargingsteknikk som brukes for bakteriell differensiering og identifikasjon. | Mikrobiell kultur er en metode for dyrking av mikroorganismer i laboratoriet. |
| komponenter | |
| Dette bruker forskjellige reagenser, inkludert to flekker. | Dette bruker forskjellige kulturmedier som faste, halvfaste og flytende medier sammensatt av næringsstoffer og andre nødvendige forhold. |
| Grunnleggende funksjoner | |
| Dette tillater gruppering av bakterier i to grupper: gram negative og gram positive. | Dette tillater multiplikasjon av mikroorganismer til forskjellige formål. |
| Utgangspunkt | |
| Gram-flekkutfall er basert på forskjellene i peptidoglykanlaget i celleveggen. | Mikroorganismer vil vokse og formere seg innenfor kulturmediene. |
| Utfall | |
| Gram negative bakterier er synlige i rosa farge og gram positive bakterier er synlige i lilla farge. | På plater kan kolonier av mikroorganismer ses. På flytende medier er mikroorganismer i suspendert form. |
Sammendrag - Gram Stain vs Culture
Mikrobielle kulturer fremstilles og opprettholdes under laboratoriebetingelser for forskjellige formål som lagring, testing, kjemisk rensing, etc. Gramfarging er en fargeprosedyre som skiller bakterier i to hovedgrupper kalt gramnegative bakterier og gram positive bakterier. Derfor er forskjellen mellom gramfargene og kulturen at gramfarging er en fargestoffteknikk av bakterier, mens kulturen er en metode for dyrking og opprettholdelse av mikroorganismer i laboratoriene.
Henvisning:
1. Aryal, Sagar. "Gram-farging: Prinsipp, Prosedyre, Tolkning, Eksempler og Animasjon." Online Microbiology Notes. Sr., 20. september 2015. Web. 01. mars 2017.
2. "Mikrobiologisk kultur." Wikipedia. Wikimedia Foundation, 01 Feb. 2017. Web. 01. mars 2017
3. Kumar, Sabarish. "Hva er de grunnleggende teknikker for mikrobiell kultur?" Hva er grunnleggende teknikker for mikrobiell kultur? N.p., n.d. Web. 01. mars 2017
Bilde Courtesy:
1. "Gram-Cell-vegg" Graevemoore inglise Vikipeediast (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Gram Stamme" Av Y tambe - Y tambe s fil (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
3. "Anthrax Culture" By US Army Medical Research Institute of Infectious Diseases foto - (Offentlig domene) via Commons Wikimedia
