Forskjellen mellom revers fase og normal fase HPLC

De nøkkelforskjell mellom revers fase og normal fase HPLC er at omvendt fase HPLC bruker en polar stasjonær fase og en mindre polar mobil fase, mens normalfase HPLC bruker en ikke-polær stasjonær fase og en polar mobil fase.

Den normale fase HPLC er den eldste teknikken for HPLC som Tswett brukte i separasjonene av planteekstrakter; han brukte kritt i en glass kolonne. Dette var den klassiske modusen for kromatografi som førte til å navngi den som "normal" teknikk. HPLC reversert fase, derimot, er motsatt av den normale teknikken, som forskere utviklet seg i det siste.

INNHOLD

1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er omvendt fase HPLC
3. Hva er normal fase HPLC
4. Side ved side-sammenligning - Omvendt fase vs normal fase HPLC i tabellform
5. Sammendrag

Hva er omvendt fase HPLC?

Omvendt fase HPLC er en kromatografisk teknikk hvor vi bruker en hydrofob stasjonær fase. Blant alle HPLC-metoder bruker vi denne metoden til ca. 70% på grunn av sin brede anvendelighet og reproduserbarhet. Den stasjonære fasen er ikke-polær og mobilfasen er polar.

De fleste ganger bruker forskere en vandig blanding av vann med et blandbart polært organisk løsningsmiddel, slik som acetonitril eller metanol som mobilfasen. Derfor interagerer analyttene med den ikke-polare stasjonære fasen.

Hva er normal fase HPLC?

Normal fase HPLC er en kromatografisk teknikk hvor vi bruker en hydrofil stasjonær fase. Det er den tradisjonelle metoden for HPLC, selv om vi ikke bruker den så mye. Den stasjonære fasen er polar, og mobilfasen er ikke-polær. Enda viktigere er den mobile fasen av denne teknikken 100% organisk. Det betyr at det ikke brukes vann til dette.

Figur 01: En prøveprofil for normalfase- og reversfase-HPLC-kromatogrammer i henhold til polariteten av komponenter i analytten.

Typisk inneholder den stasjonære fasen silika, cyano, diol, aminobondede faser, etc. Mobile faser innbefatter organiske løsningsmidler som heksan, etylacetat, etc. Denne teknikken baserer seg på oppbevaring av løsningsmiddel eller analytmolekyler på den polare stasjonære fasen.

Hva er forskjellen mellom revers fase og normal fase HPLC?

Omvendt fase HPLC er en kromatografisk teknikk hvor vi bruker en hydrofob stasjonær fase. Den stasjonære fasen av denne teknikken er ikke-polar. Den stasjonære fasen er ikke-polær mens mobilfasen er polar. Videre bruker forskere en vandig blanding av vann med et blandbart, polart organisk løsningsmiddel, slik som acetonitril eller metanol som mobilfasen i omvendt fase HPLC. Mens normalfase HPLC er en kromatografisk teknikk hvor vi bruker en hydrofil stasjonær fase. Den stasjonære fasen av denne teknikken er polar. Den stasjonære fasen er polær mens mobilfasen er ikke-polær. I tillegg til dette bruker forskere organiske løsningsmidler som heksan, etylacetat, etc. som mobilfasen av normalfase HPLC. Nedre infografisk presenterer forskjellen mellom revers fase og normal fase HPLC i en tabellform.

Sammendrag - Omvendt fase vs normal fase HPLC

Omvendt fase og normalfase HPLC teknikker er to væskekromatografiske teknikker. Forskjellen mellom revers fase og normal fase HPLC er at revers fase HPLC bruker en polar stasjonær fase og en mindre polar mobil fase, mens normal fase HPLC bruker en ikke-polær stasjonær fase og en polar mobil fase.

Henvisning:

1. Vann. "HPLC-separasjonsmoduser." HPLC - High Performance Liquid Chromatography Forklart: Vann. Tilgjengelig her  
2. "Normalfase væskekromatografi for separasjon av isomerer og forbindelser som er instabile i vandig miljø." Normal_Phase_LC. Tilgjengelig her