Hvorfor acetokarmin brukes i myotiske kromosomstudier

Ulike flekker brukes i flekker av forskjellige biologiske materialer. Flekker reagerer med et bestemt stoff i en biologisk prøve, noe som gir en bestemt farge til stoffet. Acetokarmin er en flekk som brukes til demonstrasjon av nukleinsyrer i kromosomet. Det er også noen andre grunner som gjør acetokarmin mer egnet som nukleinsyre flekk. De diskuteres i denne artikkelen.

Nøkkelområder dekket

1. Hva er et flekk
     -  Definisjon, typer flekker
2. Hva er acetokarmin
     - Definisjon, egenskaper, forberedelse
3. Hvorfor acetokarmin brukes i myotiske kromosomstudier
     - Forberedelse, bruk av acetokarmin

Nøkkelbetingelser: Acetokarmin, kromosomer, formaldehyd, hydrolyse, mytotiske kromosomstudier, flekker

Hva er Staining

Staining er en teknikk som brukes i mikroskopiske studier av biologiske prøver for å forbedre kontrasten av den biologiske prøven under mikroskopet. Det fremhever strukturer av biologisk vev, slik som spesifikke cellepopulasjoner, organeller, DNA, proteiner, karbohydrater og lipider. Flekken kan enten være syntetiske kjemikalier eller naturlige kjemikalier som kommer fra planter eller dyr. Fargemetoder er beskrevet nedenfor.

1. Enkelt flekker - Ved enkeltfarvning brukes bare en flekk til å gi en enkelt farge til hele biologiske prøven.
2. Dobbel farging - I dobbeltfarging brukes to flekker til å flekke bestemte organeller eller et bestemt område.
3. Flere farging - Ved flere farging brukes mer enn to flekker for spesifikk farging av komponenter som organeller i prøven.

Hva er acetokarmin

Carmine er et grunnleggende fargestoff fremstilt fra et insekt kjent som Coccus kaktus. Acetokarmin produseres ved å blande karmin med iseddik. Det er en DNA-spesifikk flekk som brukes til visualisering av super-spirede kromosomer i de forskjellige stadier av mitose.

Fremstilling av acetokarmin-flekk

1. Oppløs 10 g karmin i 1 liter 45% iseddik.
2. Tilsett aluminium granulat og tilbakeløp i 24 timer.
3. Filter i mørke flasker og lagre ved 4 ° C.
4. Fargingen kan intensiveres ved å tilsette ferriklorid (tilsett 5 ml av en 10% ferrikloridløsning per 100 ml% acetokarmin).

Hvorfor acetokarmin flekk brukes i myotiske kromosomstudier

Generelt er acetokarmin et fargestoff som brukes i enkeltfarvning. Det flekker både kjerne og cytoplasma. For å fargelegge kromosomer samtidig som cytoplasmaet er fargeløst, bør den biologiske prøven først behandles med formaldehyd, og så kan den hydrolyseres med HCI ved 60 ° C med riktig hydrolyseringstid. Endelig kan det behandles med acetokarmin. Acetokarmin produserer store fargestoffaggregater i svake sure forhold (pH 4-5). Demonstrasjonen av løkrot-mitose ved farging med acetokarmin er vist i Figur 1.

Figur 1: Løkrotmitose

Imidlertid er acetokarmin lettgiftig enn de andre nukleinsyre flekker som aceto-orcein. Det er også billigere enn andre typer flekker.

Konklusjon

Flekker brukes i mikroskopiske studier for å forbedre kontrasten av spesifikke biologiske komponenter i en prøve. Acetocarmin er en slik flekk som brukes til å flekke nukleinsyre inne i celler. Som acetokarmin spesifikt flekker kromosomer bortsett fra cytoplasma, kan den brukes til å visualisere kromosomer i mitotiske studier.

Henvisning:

1. "ACETOCARMINE STAINING." Kansas State University, tilgjengelig her.
2.J. A. Rattenbury (2009) Spesifikk farging av nukleolært stoff med Aceto-Carmine, Stain Technology, tilgjengelig her.

Bilde Courtesy:

1. "Onion root mitosis" Ved staticd - Eget arbeid (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia