De hovedforskjell mellom levedyktige og uverdige celler er det levedyktige celler kan vokse mens ikke-verdifulle celler er døde og ikke kan vokse. Videre er kryokonserverte frosne celler levedyktige mens snapsfrosne celler er uverdige.
Levende og uverdige celler er to typer celler i cellekulturer. Identifisering av forskjellen mellom levedyktige og ikke-gunstige celler kan gjøres ved bruk av strømningscytometri eller forskjellige flekker.
1. Hva er levedyktige celler
- Definisjon, Cryopreserving, Plate Counting
2. Hva er misunnelsesverdige celler
- Definisjon, fakta, flytcytometrisk telling
3. Hva er likhetene mellom levedyktige og uverdige celler
- Oversikt over vanlige funksjoner
4. Hva er forskjellen mellom levedyktige og uverdige celler
- Sammenligning av nøkkelforskjeller
Cryoprotectant, Flow Cytometric Counting, Nonviable Cells, Plate Counting, levedyktige celler, levedyktige flekker
Levende celler er cellene som kan vokse i en cellekultur. Derfor lever de. Det er imidlertid nødvendig å fryse cellene for å holde dem i lang tid i laboratoriet. Her er DMSO (dimetylsulfoksyd) en viktig ingrediens i mediet. Hovedfunksjonen til DMSO er å fjerne intracellulært vann fra cellene sakte, og beskytte splittelsen av cellemembranen fra isdannelsen under avkjøling. Dette beskytter også organellene mot isdannelse. Derfor fungerer DMSO som en kryobeskyttende middel som cryopreserverer celler under frysing. De frosne cellene kan tines senere og plasseres i et vekstmedium.
Figur 1: DMSO
Dessuten er talltelling den meget anvendte metoden for levedyktig celletelling; dette identifiserer antall aktivt voksende celler i en prøve. Spread plate metode og strikke plate metode er to metoder i plate telling.
Nonviable celler er cellene som ikke kan vokse for å produsere kolonier i en cellekultur. Men det totale antallet celler inkluderer både levedyktige og uverdige celler i en bestemt kultur. Spesielt er de cellene som har gjennomgått snapfrysing (prosessen med rask frysing av prøver med tøris) ikke lenger levedyktige da deres cellemembraner knuses som følge av rask frysing.
Figur 2: Urin dyrket på Oksoid Brilliance UTI Agar Plate
Pasientprøve med klinisk urinveisinfeksjon (UTI) (topp), blandet kultur (bunn)
Flekker er involvert i diskrimineringen mellom levedyktige og ikke-gunstige celler ved hjelp av flytcytometriske metoder. De typer flekker som flekker uverdige celler er Trypan blue, Nigrosin og Erythrosin B. Cellemembranen til de levedyktige cellene utelukker disse flekkene. Men flekker går inn i cytoplasmaet til både døde og skadede celler. Videre flekker levedyktige flekker bare de levedyktige celler ved å gå inn i cellene ved hjelp av mobilmekanismer. Methylenblå er en levedyktig flekk.
Levende celler refererer til levende celler mens uverdige celler refererer til døde celler som ikke er i stand til å leve, utvikle eller reprodusere. Dermed er dette hovedforskjellen mellom levedyktige og uverdige celler.
Videre kan levedyktige celler vokse mens ikke-gunstige celler ikke klarer å vokse.
Mens levedyktige celler er i live, er ikke-verdifulle celler døde.
En annen forskjell mellom levedyktige og uverdige celler er at cellene som er frosset med kryobeskyttende midler, er levedyktige mens snapfrosne celler er uigennyttige.
Trypanblå, Nigrosin og Erythrosin B flekker uverdige celler mens Methylenblå flekker levedyktige celler. Derfor er dette en annen forskjell mellom levedyktige og uverdige celler.
Levende celler er cellene som kan vokse i cellekulturer mens ikke-verdifulle celler ikke kan vokse i cellekultur. Videre er det mulig å opprettholde cellens levedyktighet ved å fryse dem sammen med DMSO. Men snap-freezing ødelegger cellemembranen. Derfor er hovedforskjellen mellom levedyktige og ikke-gunstige celler evnen til å vokse celler i cellekultur.
1. "Counting Bacteria | Boundless Microbiology." Lumen Læring, Lumen, tilgjengelig her
1. "Dimetylsulfoksid" Av NEUROtiker - Eget arbeid (Public Domain) via Commons Wikimedia
2. "Urin dyrket på Oxoid Brilliance UTI Agar plate" Av Nathan Reading fra Halesowen, UK - Urin Culture - Oxoid Brilliance U.T.I. Agar (CC BY 2.0) via Commons Wikimedia