Forskjellen mellom preparativ og analytisk sentrifugering

Hovedforskjell - Preparative vs Analytical Centrifugation

Sentrifugering er en separasjonsmetode hvor applikasjonen av sentrifugalkraften sedimenterer eller fraksjonerer en heterogen blanding. Mikrosentrifugering, høyhastighets sentrifugering og ultracentrifugering er de tre typene sentrifugering basert på volum og hastighet som brukes i prosessen. Blant annet sentrifugeringsmetoder bruker ultracentrifugering maksimal vinkelhastighet. Den roterende hastigheten til ultracentrifugering er så høy som 1 000 000 g. Således blir ultracentrifugering brukt til å isolere små partikler som ribosomer, proteiner og virus. Forberedende og analytisk sentrifugering er de to typer ultracentrifugeringsmetoder. De hovedforskjell mellom preparativ og analytisk sentrifugering er det preparativ sentrifugering brukes i pelletering av små materialer som membraner, organeller, virus, DNA og RNA mens analytisk sentrifugering brukes til å bestemme massen og formen til makromolekyler som proteinkomplekser og sedimenteringshastighet av molekyler.

Nøkkelområder dekket

1. Hva er preparativ sentrifugering
     - Definisjon, fakta, bruksområder
2. Hva er Analytisk sentrifugering
     - Definisjon, fakta, bruksområder
3. Hva er likhetene mellom forberedende og analytisk sentrifugering
     - Oversikt over vanlige funksjoner
4. Hva er forskjellen mellom forberedende og analytisk sentrifugering
     - Sammenligning av nøkkelforskjeller

Nøkkelbetingelser: Analytisk sentrifugering, analytiske prosesser, tetthetgradient sentrifugering, høyhastighets sentrifuge, preparativ sentrifugering, små partikler

Hva er preparativ sentrifugering

Forberedende sentrifugering refererer til en høyhastighets sentrifuge som anvendes ved separering av små submikroskopiske partikler. Det separerer små partikler som virus, viruspartikler, proteinkomplekser, proteiner, lipoproteiner, RNA og plasmid-DNA. En Beckman-Coulter preparativ sentrifuge med rotor innsiden er vist i Figur 1.

Figur 1: Beckman-Coulter Preparative Centrifuge

Den preparative sentrifugering kan også brukes som en tetthetgradient sentrifugeringsmetode. Sukrose gradienten kan brukes til å separere cellulære organeller. Cesiumgradient kan brukes til å separere nukleinsyrer.

Hva er Analytisk sentrifugering

Analytisk sentrifugering refererer til en høyhastighets sentrifuge anvendt i analyseprosessene. Det brukes til å oppnå informasjon om typer molekyler i en bestemt prøve ved å kjenne den generelle formen, konformasjonsendringer og støkiometri av underenhetene. Det kan også brukes til å bestemme sedimenteringshastigheten til partikler. En ultracentrifuge er vist i figur 2.

Figur 2: Beckman Coulter Optima LE-80K Ultracentrifuge

Et optisk deteksjonssystem er forsynt med den analytiske sentrifugen for å overvåke spinningen av prøven i sanntid. Sedimentasjonshastighetseksperimenter og sedimenteringsvektsforsøk er de to hovedtyper av eksperimenter utført med analytisk sentrifugering.

Likheter mellom preparativ og analytisk sentrifugering

• Både preparativ og analytisk sentrifugering er typer ultracentrifugeringsmetoder som drives ved høye hastigheter, slik som 1 000 000 g.
• Både preparativ og analytisk sentrifugering brukes til å separere små partikler.

Forskjellen mellom preparativ og analytisk sentrifugering

Definisjon

Forberedende sentrifugering: Forberedende sentrifugering refererer til en høyhastighets sentrifuge som anvendes ved separering av små submikroskopiske partikler.

Analytisk sentrifugering: Analytisk sentrifugering refererer til en høyhastighets sentrifuge anvendt i analyseprosessene.

Analytiske prosedyrer

Forberedende sentrifugering: Forberedende sentrifugering kan ikke brukes i analytiske prosedyrer.

Analytisk sentrifugering: Analytisk sentrifugering brukes i analytiske prosedyrer.

Type prøver

Forberedende sentrifugering: Forberedende sentrifugering brukes i pelletering av små materialer som membraner, organeller, virus, plasmid-DNA og RNA.

Analytisk sentrifugering: Analytisk sentrifugering brukes til å bestemme massen og formen til makromolekyler som proteinkomplekser og sedimenteringshastigheten av molekyler.

Eksempelvolum

Forberedende sentrifugering: En stor prøvestørrelse kan behandles ved preparativ sentrifugering.

Analytisk sentrifugering: Bare små prøvevolumer (mindre enn 1 ml) kan behandles ved analytisk sentrifugering.

Renhet av prøven

Forberedende sentrifugering: Mindre rene prøver kan brukes i preparativ sentrifugering.

Analytisk sentrifugering: Relativt rene prøver brukes i den analytiske sentrifugering.

Sedimentasjonskoeffisient og molekylvekt

Forberedende sentrifugering: Forberedende sentrifugering kan brukes til å bestemme sedimentasjonskoeffisienten og molekylvekten.

Analytisk sentrifugering: En nøyaktig sedimenteringskoeffisient og molekylvekt benyttes ved analytisk sentrifugering.

Optisk utlasting

Forberedende sentrifugering: Fraksjonene kan samles etter kjøringen i preparativ sentrifugering, og det er ingen optisk utlasting under løpet.

Analytisk sentrifugering: Fremdriften av den analytiske sentrifugering kan observeres visuelt under analytisk sentrifugering.

Kjølingsarrangementer

Forberedende sentrifugering: Ingen kjøleanordning brukes i preparativ sentrifugering.

Analytisk sentrifugering: Som høy hastighet genererer mer varme, bør en kjøleanordning brukes i den analytiske sentrifugering

Type maskiner

Forberedende sentrifugering: L5-65 og L5-75 brukes i preparativ sentrifugering.

Analytisk sentrifugering: Beckman Model E brukes i analytisk sentrifugering.

Konklusjon

Forberedende og analytisk sentrifugering er de to typer ultracentrifugeringsmetoder som bruker høyhastighets sentrifugering. Forberedende sentrifugering brukes til å separere små partikler som ribosomer, plasmid-DNA og RNA. Imidlertid brukes analytisk sentrifugering hovedsakelig for å oppnå analytiske målinger av prøven. Hovedforskjellen mellom preparativ og analytisk sentrifugering er formålet med hver type sentrifugering under prøvebehandling.

Henvisning:

1. Aswathi K S, Student ved Sentraluniversitetet i Kerala Følg. “Ultrasentrifugering”. LinkedIn SlideShare, 17. november 2015, tilgjengelig her.

Bilde Courtesy:

1. "Beckman-Coulter preparativ sentrifuge Avanti J25-03" Etter ekte navn: Matylda Sękpl.wiki: Cygaretkacommons: Cygaretka - Egne arbeider (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Ultracentrifuge" Av Mlw3559 på engelsk (CC BY-SA 2.5) via Commons Wikimedia