Forskjell mellom situasjon Hybridisering og immunhistokjemi
Share
Nøkkelforskjell - In situ Hybridisering vs Immunohistokjemi
Kreft- og smittsomme sykdomsdiagnostikk er en populær trend hvor nye proteomikk og genomics-baserte teknikker benyttes for å identifisere svulster eller smittsomme celler, dens spredning og stedene for celleutvikling og analysere det genetiske grunnlaget for de fleste overførbare og ikke-smittsomme sykdommer. Dette vil resultere i nøyaktig behandling av medisiner og utforming og utvikling av tilpassede behandlinger for sykdommer. In situ hybridisering (ISH) og immunohistokjemi (IHC) er to så vidt brukte teknikker i kreftbiologi, og nøkkelforskjellen mellom in situ hybridisering og immunokjemi ligger i molekylene som brukes i analyseprosedyren. I ISH brukes nukleinsyreprober i analyse mens i IHC brukes monoklonale og polyklonale antistoffer til de diagnostiske bestemmelsene.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er In situ Hybridization
3. Hva er immunohistokjemi
4. Likheter mellom Hybridisering og Immunohistokjemi
5. Side ved side-sammenligning - Situasjon Hybridisering vs Immunohistokjemi i tabellform
6. Sammendrag
Hva er In situ Hybridization (ISH)?
In situ hybridisering er en nukleinsyrehybridiseringsteknikk som utføres direkte på en del eller seksjon av vev, i hele vevet eller i celler. Teknikken avhenger av teorien om Watson Crick-komplementær baseparering, noe som resulterer i enten DNA-DNA-hybrider eller DNA-RNA-hybrider som kan oppdage muterte gener eller identifisere det nødvendige gen av interesse. Enkelstrengede DNA-sekvenser, dobbeltstrengede DNA-sekvenser, enkeltstrengede RNA-sekvenser eller syntetiske oligonukleotidsekvenser blir brukt som prober under hybridiseringsteknikk, og disse prober er merket med et radioaktivt fosfor ved sin 5'-ende for identifikasjonsprosedyrer ved autoradiografi eller merket med fluorescerende fargestoffer . Det finnes forskjellige typer ISH-teknikker som er tilgjengelige ut fra hvilken type probe som brukes og typen av visualiseringsteknikk som følger.
Figur 01: Fluorescerende In situ Hybridisering
Det er mange bruksområder av ISH, hovedsakelig i molekylærdiagnostikk av smittsomme sykdommer for å identifisere tilstedeværelsen av patogener og for å bekrefte patogenet via molekylær diagnostikk. Den brukes også innen utviklingsbiologi, karyotyping og fylogenetisk analyse og fysisk kartlegging av kromosomer..
Hva er immunhistokjemi (IHC)?
I teknikken for IHC er det analyserte hovedmolekylet antigenet. Under IHC benyttes monoklonale og polyklonale antistoffer for å bestemme tilstedeværelsen av antigener ved infeksjon eller malign celleproliferasjonsstatus. Teknikken er basert på antigen-antistoff-binding, og enzymmerker brukes for denne teknikken; En slik applikasjon er ELISA (Enzym-koblet immunosorbentanalyse). Markørene kan også være fluorescerende merkede antistoffer eller radio-merkede antistoffer.
Figur 02: Immunohistokjemi
IHC er mye brukt for kreftcelledeteksjon. Diagnostiske prosedyrer målretter antigenene tilstede på tumorceller for å identifisere og karakterisere tumoren. Den samme prosedyren er innarbeidet for å diagnostisere smittsomme stoffer. Monoklonale og polyklonale antistoffer brukes også til å analysere forskjellige genprodukter ved å muliggjøre antistoff-antigenbindingsreaksjonen mellom det ønskede protein og det syntetiske antistoff administrert.
Hva er likhetene mellom i situ-hybridisering og immunhistokjemi?
- ISH og IHC er svært spesifikke reaksjoner.
- Begge teknikkene er svært nøyaktige.
- Begge teknikkene kan brukes til diagnostisering av kreft og smittsomme sykdommer.
- Disse teknikkene utføres i sterile in vitro-miljøer.
- Begge er raske teknikker som gir reproduserbare resultater.
- ISH og IHC bruk deteksjon metoder som radio merking og fluorescens teknikker.
Hva er forskjellen mellom i situ-hybridisering og immunhistokjemi?
I situ Hybridisering vs Immunohistokjemi | |
| ISH er en nukleinsyrehybridiseringsteknikk som utføres direkte på en del eller en del av vev eller hele vevet. | IHC er en teknikk hvor monoklonale og polyklonale antistoffer benyttes for å bestemme tilstedeværelsen av antigener, som er spesielle proteinmarkører plassert på celleoverflatene. |
| Type biomolekyler analysert | |
| ISH analyserer nukleinsyrer. | IHC analyserer proteiner-antigener. |
| Grunnlag for biokjemisk reaksjon | |
| Komplementær baseparering mellom DNA-DNA eller DNA-RNA forekommer i denne teknikken. | Antigen-antistoff-interaksjoner er involvert i immunhistokjemi. |
| Enzyme-Linked Detection Methods | |
| Enzymkoblede deteksjonsmetoder kan ikke brukes i ISH. | Enzym-koblede deteksjonsmetoder kan brukes i IHC. |
Sammendrag - In situ Hybridisering vs Immunohistokjemi
Molekylær diagnostikk er raske og bekreftende metoder som kan benyttes til å identifisere en ikke-overførbar sykdom som kreft eller smittsom sykdom, slik HIV eller tuberkulose basert på molekylær markører tilstede på cellene som fører til manifestasjon av sykdommen. Molekylære markører kan være til stede i form av uttrykte proteiner eller på det genetiske nivå basert på hvilke forskjellige nye teknikker som innføres for å øke effektiviteten og er mindre arbeidskrevende, selv om det er en høy kostnad involvert med disse teknikkene. Dermed er ISH avhengig av DNA-DNA eller DNA-RNA hybriddannelse, og IHC avhenger av de spesifikke reaksjonene mellom antistoff og antigen. Dette er forskjellen mellom in situ hybridisering.
Last ned PDF Versjon av In situ Hybridisering vs Immunohistokjemi
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til off-line formål som per sitatnotat. Vennligst last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom In situ Hybridisering og Immunohistokjemi.
referanser:
1. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Anvendelser av immunhistokjemi." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, aug. 2012, Tilgjengelig her. Tilgang 24. august 2017.
2. "In situ Hybridization (ISH)." National Center for Biotechnology Information, U.S. National Library of Medicine, Tilgjengelig her. Tilgang 24. august 2017.
Bilde Courtesy:
1. "FISH (Fluorescerende In situ Hybridization)" Av MrMatze - Eget arbeid (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Immunohistochemicalstaining2" Ved Imoen på engelskspråk Wikipedia (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
