Mikroorganismer dyrkes i laboratorier og næringer for ulike formål som karakterisering, differensiering, identifikasjon, utvikling av antibiotika, utvikling av vaksiner, produksjon av transgene (GMO) planter og dyr, og ekstraksjon av organiske syrer. De dyrkes i kunstig syntetiserte voksende medier eller i naturlige substrater. Derfor bør forskjellige typer sterile friske medier fremstilles, og de ønskede mikroorganismer dyrkes i rene eller blandede kulturer. Mediene suppleres med alle næringsstoffer som er nødvendige for veksten av mikroorganismen. Virkningen av å innføre mikroorganismen i frisk medium eller substrat er kjent som inokulering. Imidlertid bør de optimale vekstbetingelsene gis for å oppnå en tilstrekkelig vekst av mikroorganismen. Prosessen med å tilveiebringe de nødvendige vekstbetingelser slik som temperatur, fuktighet og pH og tillater mikroorganismer å vokse på media er kjent som inkubering. Dermed er nøkkelforskjellen mellom inokulasjon og inkubasjon det inokulering er innføring av mikroorganismer til voksende medier eller substrater samtidig som inkubasjon tillater at mikroorganismer vokser under tilveiebragte vekstbetingelser.
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er inokulasjon
3. Hva er inkubasjon
4. Side ved side sammenligning - Inokulasjon mot inkubasjon i tabellform
5. Sammendrag
Inokulering er prosessen med å introdusere mikroorganismer i et voksende medium som er egnet for deres vekst. Med andre ord kan inokulering defineres som prosessen som introduserer en patogen eller antigen mikroorganisme inn i en levende organisme for å stimulere produksjon av antistoffer. Når inokuleringen er fullført, begynner mikroorganismer å vokse og formere seg i mediet ved å danne synlige kolonier.
Det finnes forskjellige typer inokuleringsverktøy og teknikker som brukes i mikrobiologi. Inokuleringssløyfe, inokuleringsnål, bomullspinne, pincet, glasspredere, dispenserpipetter er de vanligste inokulasjonsverktøyene i laboratorier. Alle disse materialene skal være fri for forurensninger. Derfor, før inokulering, er det nødvendig å sterilisere dem ved bruk av en egnet steriliseringsteknikk for å unngå forurensninger eller veksten av uønskede mikroorganismer i kulturmediet. Streak plate metode, spredning sted metode, pour plate metode, punkt inokulering, stab kultur, slant kultur er flere inokulering teknikker som brukes i mikrobielle laboratorier for å vokse bakterier og sopp.
Figur 01: Inokulering av bakterier ved hjelp av strekplatteteknikk
Mikroorganismer har forskjellige vekstkrav. De skal være utstyrt med nødvendige næringsstoffer, vann, mineraler, vekstfaktorer, sporstoffer og andre vekstforhold. Etter inokulering av en mikrobe i et friskt medium, bør dyrkningsbetingelsene opprettholdes for å understøtte veksten av mikroorganismen. Prosessen med å la mikroorganismer vokse i et medium ved å gi nødvendige vekstbetingelser er kjent som inkubasjon. Inokulerte kulturplater kan plasseres inne i en anordning som kalles inkubator for inkubering. Inkubatorer er utformet på en slik måte at operatøren kan styre temperatur, fuktighet, gasskonsentrasjoner etc. i henhold til mikrobebehovet.
Når optimale forhold blir gitt, har mikroorganismer en tendens til å vokse, reprodusere og formere ved å benytte de tilgjengelige næringsstoffene i mediet. Mikrobiell vekst har fire forskjellige faser i et kulturmedium. Etter inokuleringen starter de lagfase. Under lagfasen viser mikrober ikke en rask vekst eller multiplikasjon. De begynner å tilpasse seg det nye miljøet og stabilisere seg der. Når de er justert, initierer den andre fasen, som viser en eksponentiell vekst av mikroorganismen. Den andre fasen er kjent som loggfase eller eksponensiell fase. I logfasen viser mikrober optimal vekst og multiplikasjon. Den tredje fasen starter etter loggfasen når næringsstoffene og andre krav er begrenset i mediet. Under stasjoner fase, vekst og døende satser blir like, og vekstkurven ligger i en rett linje parallelt med x-aksen. Den fjerde fasen er dødsfase hvor dødeligheten overstiger vekstraten. Etter flere dager opphører mikrobiell vekst, og etterlater en død kultur.
Figur 02: Microbial plate inkubator
Inokulasjon mot inkubasjon | |
Inokulering er prosessen med å introdusere mikroorganismer eller suspensjon av mikroorganismer i et kulturmedium. | Inkubasjon er prosessen med å tillate inokulerte mikroorganismer å vokse under nødvendige dyrkningsbetingelser. |
Verktøy brukt | |
Inokulering kan gjøres ved å bruke inokulerende nåler, inokulerende sløyfer, bomullsbytter, pipetter, etc.. | Inkubasjon kan gjøres i et kulturrom, inkubator, kulturstativ, etc. |
Tid | |
Inokulering utføres innen kort tid. | Inkubasjon tar flere timer til dager. |
Forhold opprettholdt | |
Inokuleringen foregår under aseptiske forhold i et laminært luftskap. | Inkubasjon gjøres ved å gi egnede vekstbetingelser som temperatur, fuktighet, oksygenkonsentrasjon, lys osv. |
Inokulering og inkubasjon er to hovedtrinn involvert i dyrking av mikroorganismer i laboratorier. Inokulering er virkningen av å introdusere mikroorganisme til et egnet dyrkningsmedium eller substrat. Inokulert medium er forsynt med egnede vekstbetingelser for å vokse og formere seg. Denne prosessen er kjent som inkubasjon. Dette er den viktigste forskjellen mellom inokulasjon og inkubasjon. Det er spesielle verktøy og utstyr i mikrobiologiske laboratorier for inkuberingsformål. Inkubatoren er en anordning som gjør at mikroorganismer kan vokse under kontrollert temperatur, lufting, fuktighet etc. Inokulering og inkubering skal utføres etter riktige aseptiske forhold for å hindre forurensninger og tidsspill.
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til offline-formål som i sitatnotater. Vennligst last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom inokulasjon og inkubasjon.
1. "EKSPERIMENTER FOR Å VISSE BAKTERIENS VEKST - grunnleggende teknikker." Mikrobiologiske teknikker - det grunnleggende. N.p., n.d. web. Tilgjengelig her. 7. juni 2017.
2. "Vekstfrekvens og temperatur - Ubegrenset åpen lærebok." Ubegrenset. Ubegrenset, 17. august 2016. Web. Tilgjengelig her. 7. juni 2017.
1. "Streakplater" (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Mikrobiologiske plater inkubator-02" Ved ekte navn: Matylda Sękpl.wiki: Cygaretkacommons: Cygaretka - Eget arbeid (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia