I sammenheng med mikroskopi betraktes farging som et viktig skritt under forbedring av kontrast i det mikroskopiske bildet, spesielt for å markere forskjellige strukturer i biologiske vev. Under farging av perifert blod og benmarvsprøver, brukes Wright og Giemsa flekker. Disse flekker er kjent som Romanowsky flekker. Begge disse flekkene består av viktige komponenter: oksidert metylenblått, eosin Y og azurblå B-fargestoffer. Funksjonen av metylenblått og azurblått B er å plette kjernen med farger som varierer fra blå til lilla. Disse flekkene blir mye brukt under studiet av rød blodcellemorfologi og under utførelsen av differensielle hvite blodlegemer. Diagnose av forskjellige sykdomstilstander som leukemi kan oppnås gjennom Romanowsky-fargeprosedyrer. Wright-farging brukes til å skille blodceller som består av en blanding av eosin og metylenblå fargestoffer. Giemsa-farging benyttes under farging av bakterielle celler, så vel som humane celler, og kan kombineres med Wright-flekk for å utvikle Giemsa Wright-flekk. Dette er nøkkelen forskjellen mellom Giemsa flekken og Wright flekken.
Giemsa flekk brukes til cytogenetika og histopatologisk diagnose av parasitter av malaria og andre parasittiske sykdommer. Giemsa flekk kan også betraktes som en grunnleggende flekk i klassifiserende lymfomer i klassifiseringen av Kiel. Giemsa-flekk er nødvendig for Giemsa-banding som vanligvis kalles G-banding. Giemsa banding brukes til å plette kromosomer og brukes også til å skape karyogram. Kromosomale abnormiteter som translokasjoner og omarrangementer er identifisert gjennom Giemsa banding. Giemsa flekk brukes i histologi på grunn av sin høye kvalitet farging av nukleærmembranen og kromatinet, metakromasien av enkelte cellulære komponenter og de forskjellige kvaliteter av cytoplasmatisk farging basert på celletypen.
Figur 01: Giemsa Stain
Giemsa-oppløsningen inneholder metylenblått, Azure B og eosin, og flekken fremstilles kommersielt ved bruk av Giemsa-pulver. Stabiliteten av flekken avhenger av metylen-azur og dets blanding sammen med metylenblå som danner et eosinat. Giemsa-flekk er spesielt for fosfatgrupper i DNA-strengen, og det blir festet til områdene der en høy mengde adenin-tyminbindinger er til stede. I Giemsa-fargemetoden er et tynt lag av prøven først plassert på en mikroskopisk glid sammen med få dråper ren metanol i ca. 30 sekunder. Deretter blir lysbildet nedsenket i 5% Giemsa-flekkoppløsning, som tilberedes fersk, i ca. 20-30 minutter. Til slutt blir lysbildet vasket med vann fra springen og igjen tørket. Giemsa-flekken er kjent som en differensiell flekk fordi Wright's-Giemsa-flekken dannes når Wrights flekk kombineres med Giemsa. Derfor kan den brukes i studien av patogene bakterier festet til humane celler. Her blir menneskelige celler og bakteriecellene farget deferentially og lilla og rosa farger observeres henholdsvis.
Wrights flekk er oppkalt etter James Homer Wright som endret Romanowsky-flekken. Wrights 'flekk brukes til å skille mellom blodcelletyper, da det bidrar til å skille mellom typer blodceller. Som et resultat kan infeksjoner diagnostiseres ved å observere antall hvite blodlegemer. Flekken er en blanding av eosin, som er rød i farge og metylenblå fargestoffer. Wrights flekk brukes til å plette og observere urinprøver, perifere blodutsmøringer og benmargsaspirater under lysmikroskoper. Wrights flekk brukes i fargingskromosomer i cytogenetikk for å fremme diagnosen av flere sykdommer og syndromer. Urinprøver som er farget med Wrights flekk, identifiserer eosinofilene som indikerer en urinveisinfeksjon.
Figur 02: Wright Stain
I Wrights flekkprosess blir en lufttørket blodfilm fremstilt og Wright-flekk påføres og forlatt i 3 minutter. Deretter blir bufferen med en like mengde flekken tilsatt, blandet forsiktig og igjen i 5 minutter. Lysbildet holdes horisontalt og vaskes godt med nøytral destillert vann. Til slutt blir det tørket og observert under mikroskopet.
Giemsa Stain vs Wright Stain | |
Giemsa-flekk er en differensialfargingsteknikk som hovedsakelig brukes til farging av bakterielle celler og også humane celler. | Wright stain er en differensiell fargingsteknikk som hovedsakelig brukes i fargeprosedyrene for blodutsmøringer, urinprøver og benmargsaspirater. |
Farging er en viktig laboratorieteknikk som brukes under mikroskopi som brukes til å forbedre kontrasten til det mikroskopiske bildet. Giemsa flekken og Wright Stain sammen kjent som Romanowsky flekker involvere i å utføre differensielle hvite blodlegemer og studerer cellemorfologi av røde blodlegemer. Oksidert metylenblått, eosin Y og azurblå B-fargestoffer er de viktigste komponentene i Romanowsky-flekker. Primært er Giemsa-flekk utnyttet under farging av bakterieceller, men det kan også benyttes til humane celler. Wright-farging er mye brukt under farging av blodutsmøringer, urinprøver og benmargsaspirater. Dette er forskjellen mellom Giesma-flekken og Wrights flekk.
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til off-line formål som per sitatnotat. Vennligst last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom Giemsa Stain og Wright Stain
1. Barcia, J. J. "Giemsa flekken: dens historie og applikasjoner." Internasjonal tidsskrift for kirurgisk patologi., U.S. National Library of Medicine, juli 2007, Tilgjengelig her. Tilgang 12 september 2017
2. Krafts, K P og S E Pambuccian. "Romanowsky-fargetone i cytopatologi: historie, fordeler og begrensninger." Bioteknisk og histokjemi: Offisiell publisering av Biologisk Stainkommisjon., U.S. National Library of Medicine, apr 2011, Tilgjengelig her. Tilgang 12 september 2017
1. "Trypanosoma-evansi-rotte-blod-Giemsa-flekken" Av Alan R Walker - eget arbeid (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Mastcell, Benmarg Aspirat, Wright Stain (5916735712)" Av Ed Uthman fra Houston, TX, USA - Mastcell, Benmarg Aspirat, Wright StainUploaded by CFCF (CC BY 2.0) via Commons Wikimedia