Eluent vs Eluate
Kromatografi er en mye brukt metode for å separere komponenter fra en blanding. Denne metoden bruker en stasjonær fase og en mobil fase. Komponenter av en blanding bæres gjennom den stasjonære fasen ved strømmen av mobil fase. I kromatografi er separasjoner basert på forskjeller i migrasjonsrate blant de mobile fasekomponentene. I en pakket kolonne løses komponenter ved eluering. Kolonnen består av et smalt rør, som er pakket med et fast stoff som holder den stasjonære fasen. Den faste selv kan være den stasjonære fasen. Noen ganger brukes et inert fast stoff som holder den stasjonære fasen. Mobilfase kan bli introdusert fra toppen av røret, og den vil da oppta mellomromene mellom de stasjonære faser. I utgangspunktet lastes oppløsningsblandingen som inneholder komponentene, som må løses, inn i kolonnen. For lasting kan en del mobilfase brukes. I henhold til polariteten fordeler komponentene i blandingen mellom stasjonær fase og mobilfasen. Eluering skjer da ved å tvinge prøvekomponentene gjennom kolonnen ved kontinuerlig tilsetning av frisk mobil fase. Til tider kan komponentene som kommer ut av kolonnen samles inn i reagensrør. Som mobilfase kan vi bruke løsningsmiddelblandinger avhengig av komponentene vi trenger å skille fra. Ved å bruke en serie løsemidler i henhold til en polaritetsgradient, kan vi skille alle komponentene individuelt. Annet enn den ovenfor forklarte væskekromatografimetoden, kan vi også bruke gasskromatografi for å skille gassformige prøver. I dette tilfelle er mobilfasen en gass, som er kjent som bæregassen.
elueringsmiddel
Eluent er delen av mobilfasen, som bærer prøvekomponentene med den. Ved væskekromatografi er elueringsmiddel løsningsmidlet anvendt som mobilfasen. Ved gasskromatografi er det bærergassen. Vanligvis er elueringsgassen i gaskromatografi en inert / ikke-reaktiv gass som helium eller nitrogen. Eluent beveger seg ned i kolonnen som inneholder prøven med den. Siden elueringsmiddel og den stasjonære fasen har motstridende polariteter, virker elueringsmiddel ikke med den stasjonære fasen. Derfor er bevegelsen sin uavhengig. Hvis komponentene i prøven har en lignende polaritet til eluenten, har de høy affinitet til hverandre. Dette letter bevegelsen av prøven.
eluatet
Eluat er det som kommer ut av kolonnen. Vanligvis inneholder dette mobilfase og analysene fra prøven, som vi ønsket å skille fra. Ved å endre typen elueringsmiddel som vi legger til, får vi eluat som inneholder forskjellige komponenter i prøven. Ved å fjerne den mobile fasen (ved fordampning) kan vi isolere de enkelte analysene som var i prøven.
Hva er forskjellen mellom Eluent og Eluate? • Eluent er den delen av mobilfasen som bærer prøvekomponentene med den. Eluat er kombinasjonen av mobilfasen og analysene. Derfor er eluat det vi er interessert i. • Vi legger til eluent i kolonnen, og eluat er det som kommer ut av kolonnen. • Vi kan bestemme og kontrollere hva vi legger til som elueringsmiddel, men eluatets natur er avhengig av eluenten. Vi kan ikke kontrollere dets bestanddeler 100%. |