De fleste forskningsstudier involverer dyrcellekultivering og derfor krever disse studiene vedlikehold av dyrecellelinjer under spesielle vekstforhold. Dyrcellekulturer utføres vidt i farmakologiske studier for å identifisere stoffmetabolisme, i sykdomsdiagnostikk og i kreftforskning. Cellekulturmediet er et viktig aspekt av dyrcellekultur. Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) og Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) er to kulturmedier som brukes i dyrcellekultivering. RPMI er et medium som brukes mye til å dyrke pattedyrceller i suspensjonskultur. DMEM er en modifisert type basalt medium, med økte aminosyre og vitaminkonsentrasjoner opp til en firefoldig. DMEM brukes til å dyrke celler i adherente kulturer. Nøkkelen forskjellen mellom de to media er typen kultur av media. RPMI brukes på suspensjonskulturer, mens DMEM brukes til å dyrke adherente celler.
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er RPMI
3. Hva er DMEM
4. Likheter mellom RPMI og DMEM
5. Side ved side-sammenligning - RPMI vs DMEM i tabellform
6. Sammendrag
RPMI eller Roswell Park Memorial Institute Medium er også referert til som RPMI 1640. Navnet på media ble avledet av instituttet der media ble oppdaget. Dette mediet brukes ofte i dyrcellekultur, spesielt for veksten av pattedyrceller. De ble opprinnelig utviklet for å vokse menneskelige lymfocytter.
Følgende ingredienser er inkludert i RPMI.
Den spesielle egenskapen til RPMI er den økte konsentrasjonen av fosfat i mediet. RPMI brukes i en 5% karbondioksid atmosfære. Dette vil gi maksimale og optimale forhold for celleveksten. PH i mediet holdes på 8,0 ved bikarbonatbuffersystemet.
Figur 01: Cellekultur på en petriskål
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) er et modifisert medium som er kommersielt forberedt. Den opprinnelige tekstur av mediumpulveret er gult. I DMEM økes vitaminkonsentrasjonen opp til fire ganger og derved øker næringsinnholdet i mediet.
DMEM er også modifisert ved å tilsette flere salter slik som jernnitrat, natriumpyruvat og noen ikke-essensielle aminosyrer som serin og glycin. Formuleringen av glukose i media er også endret. Den opprinnelige formuleringen består av 1000 mg / L glukose, mens i DMEM økes konsentrasjonen opp til 4500 mg / L. DMEM krever også supplering av et serummedium, da det ikke er et komplett medium. Oftest er DMEM supplert med føtalt bovint serum (FBS). FBS gir de nødvendige proteiner og vekstfaktorer for dyrkingsprosessen.
PH i mediet varierer ved tilsetning av natriumbikarbonat. pH i mediet før tilsetning av natriumbikarbonat er rundt 6,80 - 7,40, mens pH etter tilsetning av natriumbikarbonat ligger i området 7,60-8,20. Lagringstemperaturen til mediet er 2-8 0C.
Figur 02: DMEM
RPMI vs DMEM | |
RPMI er et medium som brukes mye til å dyrke pattedyrceller i en suspensjonskultur. | DMEM er en modifisert type basalt medium med økte aminosyre og vitaminkonsentrasjoner. |
Tilstedeværelse av ekstra fosfater | |
Til stede i RPMI. | Fraværende i DMEM. |
Bruk | |
| Brukes til å dyrke celler i tilhørende kulturer. Det er vant til,
|
Typer av kultur | |
RPMI brukes til suspensjonskulturer. | DMEM brukes til kulturer med celleadhesjon. |
Både RPMI og DMEM blir mye brukt i dyrcellekulturer, spesielt for å dyrke dyrecellelinjer innbefattende lymfocytter in vitro. DMEM er et modifisert basalt medium der det er en økt næringsstoffkonsentrasjon. RPMI utviklet av Roswell Park Memorial Institute, og det er også et medium som brukes i dyrcellekulturer, spesielt for pattedyrlymfocytter. Begge media er kommersielt tilgjengelige. Dette er forskjellen mellom RPMI og DMEM.
1. "RPMI Media - RPMI-1640 Media." Sigma-Aldrich. Tilgjengelig her
2. "Dulbeccos Modified Eagle's Medium - DME, DMEM." Sigma-Aldrich. Tilgjengelig her
1.Cell kultur i en liten Petri dis'By kaibara87 - opprinnelig postet til Flickr som Cell Culture, (CC BY 2.0) via Commons Wikimedia
2.'DMEM cellekulturmedium 'av Lilly_M - eget arbeid (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia