Forskjellen mellom flytcytometri og FACS

Nøkkelforskjell - Flow Cytometry vs FACS

I sammenheng med celleteori er celler den grunnleggende strukturelle og funksjonelle enheten til alle levende organismer. Cell sortering er en metode som brukes til å skille forskjellige celler i henhold til de fysiologiske og morfologiske egenskapene. De kan ha intracellulære eller ekstracellulære egenskaper. Interaksjon av DNA, RNA og proteiner betraktes som intracellulære interaktive egenskaper, mens formen, størrelsen og de forskjellige overflateproteiner regnes som ekstracellulære egenskaper. I dagens vitenskap har cellesorteringsmetodikkene bidratt til å bistå den ulike undersøkelsen i biologiske studier og også i etableringen av nye prinsipper gjennom forskning på medisin. Cell sortering utføres på ulike metoder som inkluderer både primitive med mindre utstyr og avanserte teknologiske metoder ved bruk av sofistikert maskineri. Flowcytometri, fluorescerende aktivert celle sortering (FACS), magnetcelleseleksjon og enkeltcellesortering er de viktigste metodene som benyttes. Flowcytometri og FACS er utviklet for å differensiere celler i henhold til deres optiske egenskaper. FACS er en spesialisert type flytcytometri. Flowcytometri er en metode som benyttes ved analyse av en heterogen cellepopulasjon i henhold til forskjellige celleoverflate molekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller. FACS er en prosess hvor en prøveblanding av celler er sortert i henhold til deres lysdispersjon og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere. Dette er nøkkelforskjell mellom strømningscytometri og FACS.

INNHOLD

1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er flytcytometri
3. Hva er FACS
4. Likheter mellom Flow Cytometry og FACS
5. Side ved side-sammenligning - Flowcytometri vs FACS i tabellform
6. Sammendrag

Hva er flytcytometri?

Flowcytometri er en metode som brukes til å undersøke og bestemme uttrykk for intracellulære molekyler og celleoverflaten og å definere og karakterisere forskjellige celletyper. Det brukes også til å bestemme cellevolumet og cellestørrelsen og å evaluere renheten av subpopulasjoner som er isolert. Dette gjør det mulig for multi-parameter evaluering av enkeltceller på omtrent samme tid. Flowcytometri brukes til å måle intensiteten av fluorescens som produseres på grunn av fluorescensmerkede antistoffer som bidrar til å identifisere proteiner eller ligander som binder til tilknyttede celler.

Figur 01: Flowcytometri

Generelt inneholder strømningscytometri hovedsakelig tre subsystemer. De er fluidene, elektronikken og optikken. I strømningscytometri er fem hovedkomponenter tilgjengelige som brukes i cellesortering. De er en strømningscelle (en strøm av væske som brukes til å transportere dem og justere cellene for optisk sensing prosess), et målesystem (kan være av forskjellige systemer, inkludert kvikksølv- og xenonlamper, vannkjølt eller lavpower luftkjølte lasere eller diode lasere), en ADC; Analog til Digital Converter system, amplifikasjonssystem og en datamaskin for analyse. Oppkjøpet er prosessen hvor dataene samles inn fra prøvene ved hjelp av flytcytometer. Denne prosessen er formidlet av en datamaskin som er forbundet med strømningscytometeret. Programvaren som er tilstede i datamaskinen, analyserer informasjonen som blir matet til datamaskinen fra strømningscytometeret. Programvaren har også muligheten til å justere parametere for forsøket som styrer strømningscytometeret.

Hva er FACS?

I sammenheng med flytcytometri, Fluorescensaktivert cellesortering (FACS) er en metode som benyttes ved differensiering og sortering av en prøve av en blanding av biologiske celler. Cellene er skilt fra to eller flere beholdere. Sorteringsmetoden er basert på cellens fysiske egenskaper som inkluderer lette spredning og fluorescensegenskaper av cellen. Dette er en viktig vitenskapelig teknikk som kan benyttes for å oppnå pålitelige kvantitative og kvalitative resultater av fluorescenssignaler som sendes ut fra hver celle. Under FACS, i utgangspunktet, den ferdig oppnådde blanding av celler; en suspensjon er rettet mot midten av en smal strøm av væske som strømmer raskt. Væskestrømmen er utformet for å separere cellene i suspensjonen basert på diameteren til hver celle. En vibrasjonsmekanisme påføres suspensjonsstrømmen som resulterer i dannelsen av individuelle dråper.

Figur 02: FACS

Systemet er kalibrert for å lage en enkelt dråpe med en celle. Like før dannelsen av dråper beveger strømningssuspensjonen langs et fluorescensmålingsapparat som detekterer fluorescensegenskapen til hver celle. På tidspunktet for dannelse av dråper plasseres en elektrisk ladningsring som en ladning blir indusert til ringen før måling av intensiteten av fluorescens. Når dråpene er dannet fra suspensjonsstrømmen, blir en ladning fanget i dråpene som deretter kommer inn i et elektrostatisk avbøyningssystem. Ifølge ladningen avledes systemet dråpene i forskjellige beholdere. Metoden for påføring av ladningen varierer i henhold til forskjellige systemer som benyttes i FACS. Utstyret som brukes i FACS er kjent som en fluorescensaktivert celle sorterer.

Hva er likheten mellom flytcytometri og FACS?

• Flowcytometri og FACS er utviklet for å differensiere celler i henhold til deres optiske egenskaper.

Hva er forskjellen mellom flytcytometri og FACS?

Flow Cytometry vs FACS
Flowcytometri er en metode som benyttes ved analyse av en heterogen cellepopulasjon i henhold til forskjellige celleoverflate molekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller.	FACS er en prosess hvor en prøveblanding av celler er sortert i henhold til deres lysdispersjon og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere.

Sammendrag - Flow Cytometri vs FACS

Cellen er den grunnleggende strukturelle og funksjonelle enheten av alle levende organismer. Cellsortering er prosessen hvor celler isoleres og differensieres til forskjellige kategorier basert på deres intracellulære og ekstracellulære egenskaper. Flowcytometri og FACS er to viktige metoder innen cellesortering. Begge prosessene er utviklet for å skille celler i henhold til deres optiske egenskaper. Flowcytometri er en metode som benyttes ved analyse av en heterogen cellepopulasjon i henhold til forskjellige cellemolekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller. FACS er en prosess hvor en prøveblanding av celler er sortert i henhold til deres lysdispersjon og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere. Dette er forskjellen mellom Flow Cytometry og FACS.

Last ned PDF-versjonen av Flow Cytometry vs FACS

Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til off-line formål som per sitatnotat. Vennligst last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom flytcytometri og FACS

Henvisning:

1. Flow Cytometry (FCM) / FACS | Fluorescens-aktivert cellesortering (FACS). Tilgang 22 september 2017. Tilgjengelig her
2. Ibrahim, Sherrif F., og Ger van den Engh. "Flow Cytometry and Cell Sortering." SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1. januar 1970 ... Tilgang 22. september 2017. Tilgjengelig her

Bilde Courtesy:

1. "Cytometer" Med Kierano - Eget arbeid, (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia
2. 'Fluorescensassistert cellesortering (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Utvikling av et in vitro modellsystem for å studere interaksjonen av Equus caballus IgE med sin høyaffinitet FcεRI-reseptor (PhD-avhandling), The University of Sheffield,(CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia