Forskjellen mellom elektroforese og elektroosmos

Electrophoresis vs Electroosmosis

Fysiske separasjonsmetoder som filtrering, destillasjon, kolonnekromatografi er ikke enkle metoder når det kommer til separasjon av noen molekyler. Elektroforese og elektro-osmose er to andre separasjonsteknikker som kan brukes til å separere ladede partikler.

Hva er elektroforese?

Elektroforese er en teknikk for å separere molekyler basert på deres størrelser. Fundamentalt for denne separasjonen er molekylets ladning og deres evne til å bevege seg i et elektrisk felt. Dette er den vanligste og viktigste teknikken i molekylærbiologi for å skille molekyler, spesielt DNA og proteiner. Dette er for det meste i bruk fordi det er relativt enkelt og rimelig. Apparatet for elektroforese kan være litt komplisert, og forberedelse av det tar litt tid. Men vi kan enkelt lage et elektroforeseapparat fra tingene vi har på laboratoriet. Elektroforese teknikker kan variere avhengig av våre formål. Vi kan bruke endimensjonal elektroforese til separasjon av DNA eller protein. To-dimensjonal elektroforese brukes når flere oppløste prøver kreves (som ved fingeravtrykk). En gel blir brukt som støttemedium for å separere molekylene. Denne gelen kan tilberedes som flate ark eller i rør. Grunnlaget for denne prosedyren er å skille molekyler avhengig av deres bevegelseshastighet gjennom en gel når et elektrisk felt leveres. Negativt ladede molekyler som DNA har en tendens til å bevege seg mot den positive polen i dette elektriske feltet mens positivt ladede molekyler pleier å reise til den negative polen. To typer geler brukes i elektroforese som agarose og polyakrylamid. Disse to har forskjellige løsningsmakter. Gelen virker som en sil for å filtrere de forskjellige størrelsene av molekyler. De elektrostatiske ladningene som er satt opp i gelen virker som kraften.

Separasjon avhenger av mobiliteten av ioner.

F = fv = Zee

V = ZeE / f

F = kraft som virker på en partikkel

f = friksjonskoeffisienten

V = gjennomsnittlig migreringshastighet

Z = ladning av den migrerende partikkel

e = elementær ladning

E = styrken til det elektriske feltet

De nødvendige forhold for elektroforese er relativt enkle. Når du lager gelen og kjører prøven, brukes en buffer. Markører og fargestoffer brukes til visualisering.

Hva er elektro-osmose?

Dette er prosessen med å flytte en væske gjennom et materiale som bruker et påført elektrisk felt. Bevegelsen kan være gjennom et porøst materiale, langs en kapillær membran etc. Dette kan brukes som en separasjonsteknikk (spesielt kapillær elektro-osmose). Væskens hastighet er lineært proporsjonal med det påførte elektriske feltet. Det er også avhengig av materialet som brukes til å bygge kanalen og løsningen som brukes. I grensesnittet har løsning og materiale oppnådd motsatte ladninger, og dette er kjent som et elektrisk dobbeltlag. Når et elektrisk felt påføres løsningen, beveger det elektriske dobbeltlaget av den resulterende Coulomb-kraften. Dette er kjent som den elektro-osmotiske strømningen.